近期,國家食品藥品監督管理總局組織抽檢飲料、炒貨食品及堅果制品、蔬菜制品、水產制品、肉制品、酒類和餅干等7類食品,有11批次不合格。其中飲料、炒貨食品及堅果制品中被查出菌落總數比標準規定高出好幾倍,而且這種現象并非個例。
什么是菌落總數?菌落總數即為食品檢樣經過處理,在一定條件下(如培養基、培養溫度和培養時間等)培養后,所得每g(mL)檢樣中形成的微生物菌落總數。菌落總數測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛生質量,它反映食品在生產過程中是否符合衛生要求,以便對被檢樣品做出適當的衛生學評價。菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛生質量的優劣。
目前應用于測定食品中菌落總數的方法有: 紙片法、電阻抗法等。本文參考國標法,建立了利用日本ALP公司生產的 CL-32L高壓滅菌器制備樣品的方法。
儀器準備
ALP CL-32L高壓滅菌器;
恒溫培養箱:(36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。) 均質器或振蕩器;
無菌吸管:1 ml(0.01 ml 刻度)、10 ml(0.1 ml 刻度)或微量移液器及吸頭; 無菌錐形瓶:容量 250 ml、500 ml;
無菌培養皿:直徑 90 mm 菌落計數器
樣品制備
1)平板計數瓊脂(plate count agar,PCA)培養基:蛋白胨5.0 g 、酵母浸膏2.5 g 、葡萄糖1.0 g 、瓊 脂15.0 g、蒸餾水1 000 ml、pH 7.0±0.2。將所有成分加于蒸餾水中,煮沸溶解,調節pH。分裝試管或錐形瓶,121 ℃高壓滅菌15 min。 注:用平板計數瓊脂,稱取23.5 g于1 000 ml蒸餾水中,加熱煮沸至*溶解,121 ℃高壓滅菌20min,冷卻至45~47℃左右備用。
2)無菌生理鹽水:氯化鈉(NaCl)5.875g 蒸餾水(純凈水)500ml稱取5.875gNaCl溶于500ml蒸餾水中,121 ℃高壓滅菌20min。
ALP CL-32L高壓滅菌器
型號: CL-32L
帶暖空氣干燥型高壓滅菌器型號: CL-32LDP
器滅菌艙尺寸: φ320×676mm
容量(L): 54L
操作模式: A:加熱→滅菌→排氣(可調);B:加熱→滅菌→排氣(可調)→保溫;C:融化→保溫
zui高溫度 Max: 140℃ 0.27MPa(2.7kg/cm3)
溫度范圍: 滅菌40-140℃;融化40-99℃;保溫40-60℃
操作時間: 滅菌、融化:0分鐘-10小時或連續;保溫:0分鐘-48小時
高壓滅菌器(高壓滅菌鍋)的原理與高壓鍋的原理基本相當。日本ALP公司的CL系列高壓滅菌器,采用機械鎖和電子鎖雙鎖裝置,如果鎖出現故障或蓋子沒有蓋好,儀器不會啟動;在滅菌完成后,儀器需降至80度以下及常壓,電子鎖才能開啟,可防止意外燙傷。